色譜柱是一種內(nèi)有固定相用于分離混合物的柱管，多為金屬或玻璃制作，有直管形、盤管形、U形管等形狀，被廣泛用于多個領(lǐng)域中。
一、色譜柱的清洗方法
1.以乙腈:水(1:9,v→乙腈→乙腈水(1:9,v依次沖洗,然后進(jìn)行使用。
2.多次使用后某些樣品可能會吸附到入口篩板或填料上引起柱壓升高伴隨峰形展寬的現(xiàn)象。此時,可將色譜柱與檢測器斷開,將色請柱反接后進(jìn)行沖洗。
二、色譜柱的再生方法
1.一般污染再生:
2.蛋白污染再生:0.1的水溶液異丙醇(4:1,v→乙腈:異丙醇(1:2,wv內(nèi)含0.1%)一水:異丙1:4,VM分別沖洗10~20倍柱體積。(注意每項(xiàng)過渡時,壓力的控制,壓力建議控制在1500psi以下,根據(jù)柱子的具體情況請自己優(yōu)化流速)。
三、色譜柱的應(yīng)用：
譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相，以及色譜柱的制備和操作條件。色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于Hplc的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析，只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
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