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  • 液相色譜儀的結(jié)構(gòu)原理與保養(yǎng)

    更新時間:2020-04-30  點(diǎn)擊次數(shù):3717
      在一些實驗或者工業(yè)活動中,會利用液相色譜儀進(jìn)行實驗物品中一些成分的檢測。那么液相色譜儀的結(jié)構(gòu)是什么,主要利用的什么原理呢?
     
      液相色譜儀運(yùn)用的原理類型
     
      1、分配柱色譜法
      2、吸附柱色譜法
      3、離子交換柱色譜法
      4、凝膠柱色譜法
     
      液相色譜儀的結(jié)構(gòu)組成
     
      系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。我們主要看看液相色譜儀、進(jìn)樣系統(tǒng)和分類系統(tǒng)三部分。
     
      液相色譜儀
      液相色譜儀的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。
     
      進(jìn)樣系統(tǒng)
      液相色譜儀一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
     
      分離系統(tǒng)
      該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連接管),內(nèi)徑為2~5mm,由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成).固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達(dá)1000?)和比表面積大的特點(diǎn),加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機(jī)化合物。因此,這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如,在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白分離出來。
      另外,固定相基質(zhì)粒小,柱床極易達(dá)到均勻、致密狀態(tài),極易降低渦流擴(kuò)散效應(yīng)。基質(zhì)粒度小,微孔淺,樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。根據(jù)柱效理論分析,基質(zhì)粒度小,塔板理論數(shù)N就越大。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小,會提高分辨率的道理。
      再者,高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C,通過改善傳質(zhì)速度,縮短分析時間,就可增加層析柱的效率。
     
      液相色譜儀的保養(yǎng)
     
      由于很多時候天氣潮濕,很容易使檢測器精密的光學(xué)部件性能受到影響,導(dǎo)致靈敏度下降或波長檢驗通不過,更嚴(yán)重者:燈電路板、預(yù)放大板及CPU板同時被短路擊壞。而這類情況在干燥的北方地區(qū)則比較少。由此可見,潮濕氣候?qū)x器損害之大。
      在多雨季節(jié)到來之前,勿請用戶將儀器調(diào)整放置在通風(fēng)條件好,濕度低(<70%)的實驗室內(nèi)。同時,給實驗室配備去濕機(jī)、空調(diào)及通風(fēng)裝置。表面上看,雖然增加了支出,但您的實際回報將大大超出您的支出。
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